流式單標實驗

簡要描述：流式單標實驗是伊萊博生物的基礎(chǔ)服務項目之一，是細胞平臺實驗的重要組成部分，由經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。流式細胞術(shù)工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù)，具有速度快、精度高、準確性好的優(yōu)點，是當代先進的細胞定量分析技術(shù)之一。

更新時間：2024-03-14
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流式單標步驟通常包括以下幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié)：

細胞樣品的準備。首先，需要收集目標細胞樣品，如細胞懸液或組織細胞液，以獲得細胞單層的懸浮液。然后，用PBS洗滌細胞樣品，以去除細胞培養(yǎng)基中的細胞培養(yǎng)液和廢棄物。¹00001. 制備單標熒光染色試劑?？蒲腥藛T選擇的單標熒光染色試劑是一種粘附于目標細胞表面的抗體探針，這些抗體可以特異性地與目標抗原結(jié)合，并發(fā)出熒光信號。常用的單標染色試劑有FITC（熒光素異硫氰酸酯）、PE（葡萄糖相映射學）等。

染色反應。將制備好的單標染色試劑加入之前準備好的細胞樣品中，進行充分的染色反應。染色結(jié)束后，用PBS洗滌細胞樣品，以去除未結(jié)合的熒光抗體。

流式細胞儀分析。使用流式細胞儀對染色實驗進行分析，得到關(guān)于細胞表面抗原的熒光信號。流式細胞儀可以通過激光照射懸浮細胞，檢測細胞表面與標記抗體結(jié)合的熒光強度。通過流式細胞儀的檢測系統(tǒng)，可以同時分析多個參數(shù)，如細胞大小、熒光染色強度和細胞表面抗原的表達水平。²

數(shù)據(jù)分析與報告。通過流式細胞儀獲得的原始數(shù)據(jù)可以使用不同的軟件進行分析，如FlowJo、Kalisto和Cytobank。這些軟件可以檢測和計算細胞表面抗原的表達水平，并生成圖形和統(tǒng)計結(jié)果。

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