動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型

      1.動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型 飲食造模

　　造模時(shí)的高脂飼料配方多由1%～3%膽gu醇、8%～10%豬油、0.2%丙基硫氧嘧啶、0.5%膽酸鈉、5%白糖、81.3%～85.3%普通飼料組成。

　　使用高膽gu醇飼料喂養(yǎng)純系C57BL/6小鼠16周后，在主動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈等部位發(fā)現(xiàn)了明顯的AS斑塊。

　　在高脂飲食喂養(yǎng)載脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠（ApoE-/-）12周后，發(fā)現(xiàn)小鼠動(dòng)脈內(nèi)膜增厚較為顯著，存在大量的泡沫細(xì)胞和膽gu醇結(jié)晶，并成功觀察到高脂喂養(yǎng)組小鼠的主動(dòng)脈弓形成了廣泛的AS斑塊。

　　2.動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型 基因工程

　　ApoE-/-和低密度脂蛋白受體（LDLR）敲除小鼠（LDLR-/-）是AS實(shí)驗(yàn)研究常用的兩種模型動(dòng)物。

　　ApoE是血液中最重要的載脂蛋白，介導(dǎo)了血漿脂蛋白的運(yùn)輸與清除，當(dāng)小鼠缺失ApoE時(shí)，其血液中總膽gu醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、極低密度脂蛋白（VLDL）含量都會(huì)增加，增加了小鼠AS的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

　　給予ApoE-/-小鼠普通飼料飲食，第2個(gè)月后觀察到泡沫細(xì)胞和脂質(zhì)條紋，第4個(gè)月左右觀察到纖維帽、纖維斑塊形成，5個(gè)月后可以在小鼠主動(dòng)脈根部觀察到成熟纖維斑塊。而高脂肪、高膽gu醇飲食則可以明顯加快AS的形成速度，12周左右即可于小鼠主動(dòng)脈弓部發(fā)現(xiàn)廣泛的AS斑塊。

　　LDLR是一種廣泛存在于血漿中的TC運(yùn)輸?shù)鞍?，參與介導(dǎo)LDL和VLDL的清除，小鼠缺失LDLR會(huì)導(dǎo)致其體內(nèi)中間密度脂蛋白（IDL）、LDL和乳糜微粒（CM）濃度提升，同時(shí)患上AS的風(fēng)險(xiǎn)也顯著升高。

　　使用普通飼料喂養(yǎng)LDLR-/-小鼠4個(gè)月后進(jìn)行病理檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)纖維帽和纖維斑塊形成。高脂飲食時(shí)，LDLR-/-小鼠會(huì)表現(xiàn)出更大且更晚期的AS斑塊，高脂伴膽酸飲食的LDLR-/-小鼠大約6周后可于主動(dòng)脈弓等處發(fā)現(xiàn)廣泛AS斑塊。

　　3.動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型 免疫損傷

　　模型原理：

　　動(dòng)物脂蛋白的異常改變超出了免疫耐受的限度，脂蛋白便會(huì)被機(jī)體當(dāng)作抗原，進(jìn)而引起免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體與抗原（脂蛋白）結(jié)合形成免疫復(fù)合物引起免疫損害，其中一些復(fù)合物可以沉積于血管壁，激活補(bǔ)體系統(tǒng)和殺傷細(xì)胞，損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞（VEC），最終形成AS。

　　常用的免疫刺激劑有肺炎支原體、幽門(mén)螺桿菌、EB病毒、巨細(xì)胞病毒、脂多糖等，它們可以誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展。

　　評(píng)估免疫接種對(duì)AS效果的實(shí)驗(yàn)研究主要集中于2個(gè)主要作用靶點(diǎn)，抗oxLDL抗原決定簇和HSP60免疫應(yīng)答的這種靶點(diǎn)主要通過(guò)接種疫苗提高保護(hù)性免疫應(yīng)答效應(yīng)強(qiáng)度，從而遏制AS；促進(jìn)AS的內(nèi)源性CETP和腫瘤壞死因子是第2種靶點(diǎn)，其通過(guò)接種疫苗促使自身機(jī)體產(chǎn)生抗體，抑制靶點(diǎn)的抗原效應(yīng)遏制AS病變。