簡要描述:細胞爬片的制備是免疫細胞化學(xué)、免疫熒光、TUNEL洞亡檢測的重要一步。伊萊博生物擁有專業(yè)的技術(shù)支持和實驗操作人員團隊,核心成員來自中科院、復(fù)旦、交大、同濟等國內(nèi)重點高校及科研機構(gòu),能夠提供前沿的、完善的實驗技術(shù)咨詢與服務(wù)。伊萊博致力于臨床前藥效學(xué)CRO實驗,多年的細胞爬片技術(shù)服務(wù)的經(jīng)驗,為廣大藥效學(xué)實驗提供保障。
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細胞爬片的制備
(1)如果使用載玻片或蓋玻片,必須在使用之前滅菌??梢砸淮螠缇①A存在無菌狀態(tài)下。如果使用少量的蓋玻片,用金屬鑷子夾住蓋坡片,在70%一醇中浸泡,然后在火焰上烤干。要輕輕地錫取,以防破裂為了方便起見,可以將蓋玻片浸泡干70%的一醇中,使用時放在火焰上外理。如果使用的蓋玻片或載玻片數(shù)量較多,可以將它們放干的金屋支架上,然后高壓消毒。如果需要的數(shù)量更大,則可將其放在耐熱的容器中,干烤2小時,
(2)在無菌狀態(tài)下,把干燥的玻片放于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)皿中。蓋玻片可以用金屬鑷子錫取,圓形蓋玻片可以放在24孔培養(yǎng)板的孔中,直徑90mm的培養(yǎng)皿能夠放入10-15張蓋玻片,或者放入一張標準的載玻片。
(3)將懸浮的細胞放入組織培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)至少24小時,讓細胞貼附在玻片上。要想得到一個較好的結(jié)果,在加細胞時,密度應(yīng)低,以防細胞密度過高。
(4)如果細胞數(shù)目有限,可把細胞懸液直接滴在玻片上,靜置4小時后再輕輕加入培養(yǎng)液。通過這種方式,大部分細胞燒粘附干玻片上,然后再培養(yǎng)約24小時,使細胞適當(dāng)擴增。此時,取出載玻片或蓋玻片可進行固定。
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