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原位雜交技術(shù)服務(wù)

簡要描述:原位雜交指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進行。上海伊萊博致力于臨床前藥效學(xué)CRO實驗,有著多年的原位雜交技術(shù)服務(wù)的經(jīng)驗

  • 更新時間:2023-10-30
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原位雜交實驗步驟

原位雜交第一天進行重新水化和固定、預(yù)雜交、雜交。

原位雜交第二天進行1將探針回收,放千-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)2加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1號

升,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。3置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。4置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘

重復(fù)一次。5用MABT洗兩次,每次五分鐘,放在搖床輕輕搖動。6室溫下加1ml1:2:7溶液,時間為一小時。 7 按1:

3000的比例在1∶2:7溶液中加入酶連地高XIN抗體,4C 冰箱過夜。

原位雜交第三天進行1)用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mIMABT置換

25分鐘,再用1mIMABT溶液置換,一小時以上,最后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。2)用1ml 1mM**米唑的Stainino

buffer洗一次,每次放置五分鐘。3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中,吸去staining buffer.加上300ulBM Purple AP Substrate(底

物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動,室溫下顯色。4)每隔一小時觀察胚胎是否開

始顯色5)將顯色的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚.甲醛固定,拍照。6)4C冰箱保存。

我們擁有專業(yè)的實驗室、精良的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細分、較好的的服務(wù)平臺,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,及,涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。




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