淺看免疫組化技術(shù)服務的切片制備

　　免疫組化技術(shù)服務是伊萊博生物實驗組成之一，作為常見實驗，日常實驗之一。該實驗由從事動物實驗專業(yè)，經(jīng)驗豐富的人員進行操作。免疫組化，是應用免疫學基本原理—抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及相對定量的研究方法。

　　免疫組化技術(shù)服務的切片制備：

　　1、洗載玻片：將載玻片置于重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中，目的是為了將載玻片上的硅膠等除去，同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表面變平整，便于組織吸附，然后置于清水中清洗，除去殘余的重鉻酸鉀和濃H2SO4(大約沖一個小時左右)，再將載玻片浸泡于酒精之中，然后放到架子上，置于37°C溫箱中，將多聚賴氨酸涂布于玻片的表面，由于Lys帶正電，而大多數(shù)的組織帶負電荷，從而產(chǎn)生吸附作用。

　　2、包埋組織：先在鐵模具中加入一些液態(tài)石蠟，先稍微冷卻，然后再將待包埋的組織置于石蠟之中，并排列整齊，再將塑料模具盒蓋上，后加入少許液體石蠟，進行冷凍，使石蠟變成固態(tài)。

　　3、切片：將包埋好的組織從模具上取下來，并置于石蠟切片機上，切片機通過調(diào)節(jié)上下左右來使組織和切割方向一致，然后調(diào)節(jié)切片的厚度，一般為5mm，如果比較難切，則可以適當調(diào)整厚度。用小鑷子將包含有完整組織的載玻片置于40°C溫水中。

　　4、撈組織：當組織載玻片置于40°C溫水中之前，要先將水浴中的氣泡趕走，以免氣泡受熱上浮而貼到組織上，組織受熱展開，好是組織不起皺紋，用載玻片撈組織時，一般取載玻片的下1/3或者下1/2一般每種組織撈5-6張，其中2-3張是備用的，每張載玻片上通常撈兩份組織，做對照使用，這樣形成的誤差就比較小了，而且撈載玻片的時候好方向一致，以便觀察，再將撈出來的載玻片置于架子上，放入37°C溫箱中烘干。